• 正在加载中...
  • 富血小板血浆

    富血小板血浆( plate let rich plasma, PRP) 是自体全血经过梯度离心、分离得到的血小板浓缩物, 血小板含量丰富。当血小板激活时, 能释放多种生长因子,它们在促进骨细胞和成骨细胞的增殖、生长、分化和组织的形成过程中起着重要的作用。自1998年Marx等首次用PRP复合移植骨修复下颌骨缺损以来,PRP已逐渐应用于口腔、整形、骨科、耳鼻喉科、神经外科等领域的组织修复中。

    编辑摘要

    目录

    定义/富血小板血浆 编辑

    富血小板血浆富血小板血浆

    1993年Hood等首先提出富血小板血浆(PRP)概念,并发现PRP含有丰富的血小板,其数目比全血中数目高3倍以上。血小板中含有大量的生长因子,如血小板衍生生长因子(PDGF),转化生长因子-β(TGF-β),类胰岛素生长因子(IGF),表皮生长因子(EGF),血管内皮生长因子(VEGF)等。目前,在口腔科及骨科领域,富血小板血浆研究很热门。

    富血小板血浆富血小板血浆
    富血小板血浆富血小板血浆

    性质/富血小板血浆 编辑

    富血小板血浆富血小板血浆

    富血小板血浆为新鲜血液经低速离心制备而成。将采集的全血在室温下于4~6h内以27.5~37.5转/min低速离心15~20min(或1220转/min离心5min),使红细胞、白细胞基本下沉,由于血小板比重轻,大部分保留在上层血浆中,分离出上层血浆,即为富血小板血浆,可获得全血中70%以上血小板。200ml全血所制备的富血小板血浆可采集2.5~1010血小板。主要用于各种原因所致的血小板减少症和血小板功能缺陷患者出血的预防和治疗。

    富血小板浆富血小板浆

    案例/富血小板血浆 编辑

    格兰杰在上赛季对阵迈阿密热火的季后赛中左膝受伤。在一段时间的恢复之后,格兰杰在夏末进行训练时不慎造成伤情出现反复,随后他还接受了富血小板血浆注射治疗。

    富血小板血浆富血小板血浆

    制备/富血小板血浆 编辑

    PRP是根据血液中各组成成分沉降系数不同,通过密度梯度离心法将PRP从全血中分离出来的PLT浓缩物,但目前尚无统一的制备方法。不同离心次数、离心力、离心时间以及PLT不同的激活方式所制备的PRP中,PLT数量、各种生长因子浓度、白细胞数量各不相同;且各种手术方式以及应用PRP的时间亦产生不同的生物效应,因此产生了对PRP生物效应的分歧。根据不同生理病理需要,制备不同生长因子含量的PRP是未来研究的方向。

    PRP的制备方法大体可分为手工制备和全自动制备两种。手工制备过程较繁琐,但所需设备简单,易于开展。全自动制备需要特殊设备,目前常用设备有SmartPReP系统、Trissee系统、Plateleconcentratecollection系统、Curasau系统等。手工操作分离法与全自动血小板分离机分离法在离心后,血小板数量无明显差异,虽然全自动血小板分离机操作简便,自动化程度高,制备得到的PRP血小板纯度和浓度均高,但此方法一般用于用血量较多(一般在150ml以上)或需建立静脉循环通道,目前主要用于血库血小板的采集以进行成分输血,因其成本较高,限制了其在临床的广泛应用。但无论是何种制作方法,其制备原理均相似,即根据血液中各组分的沉降系数进行分层制备。1次离心后血液可分为3层,最底层是沉降系数最大的红细胞,最上层是上清液,交界处有一薄层,即富血小板层。一次离心后弃去上清液或红细胞层,然后改变离心力再次离心,可分离更多血小板。两次离心法仍是目前制备PRP的常用方法。刘彩霞等比较了动物模型中不同离心力和离心时间所制备的PRP对牵张成骨的影响,结果显示应用Landesberg法以两次离心(每次200×g、离心10min)法制作的PRP血小板计数明显高于全血,为全血的6.17倍;血小板回收率超过86%,促进新骨生成的作用较明显。离心力>250×g时会导致血小板破坏过多,而一次离心时间<5min得到的PRP血小板浓度与全血无明显差异。Marx等在制作PRP时发现,先进行高速离心,1次离心后界面以下2mm的红细胞层血小板浓度最高,弃去上清液后再次以低速离心,这样可更好地提取血小板。但多数学者研究认为,采用改良Appel法,即先以低速离心后吸取全部上清液、交界层下少部分红细胞置于另一支离心管,然后高速离心,所得的血小板回收率较高。

    作用机理/富血小板血浆 编辑

    对于PRP促进骨再生的机制尚未完全阐明。可能的作用机制是:PRP与凝血酶、氯化钙混合形成凝胶,其中所含的血小板α颗粒释放生长因子而起作用。其中最重要的是PDGF和TGF-β。这些生长因子在凝集十分钟后开始分泌,因此,PRP必须在凝集开始后十分钟内、在抗凝状态下制备并应用。凝集时,血小板被激活,α颗粒与血小板膜融合,通过添加组蛋白及醣侧链而成为活性状态,生长因子通过跨膜受体结合到细胞膜外表面。研究表明,成人骨髓基质干细胞、成骨细胞、成纤维细胞、内皮细胞及表皮细胞表达PRP中相关的生长因子受体。这些跨膜受体反过来诱导内源性的细胞内信号蛋白的活性,引起细胞增殖、血管生成、基质形成、胶原合成等细胞的基因序列表达。PDGF为一种糖蛋白,可刺激骨髓基质细胞的有丝分裂,增加成骨细胞的数量;也可刺激内皮细胞的生长,促进受植区的毛细血管的生成;刺激单核巨噬细胞趋化。TGF-β可激活成骨前体细胞趋化及有丝分裂,刺激胶原基质沉淀,抑制破骨细胞形成及骨吸收;血管内皮生长因子(VEGF)是强有力的血管生成因子,可促进创口愈合及血管化。

    骨修复是一个长期的过程,而血小板在创口中的寿命仅有7d,一旦颗粒耗尽,即相继死亡。在生长因子作用下的骨髓基质细胞转化为成骨细胞的活性及数量增加,成骨细胞本身也分泌TGF-β作用于邻近细胞及自身,形成良性循环。巨噬细胞也被血小板刺激后通过血管到达移植区,通过分泌巨噬细胞源性生长因子及其它因子承担调节创口愈合的功能。

    治疗领域/富血小板血浆 编辑

    治疗领域治疗领域

    PRP应用于关节软骨损伤和半月板损伤的修复中,患者注射后关节活动时更加顺畅,不适感明显减轻;应用于前交叉韧带重建术后,促进重建韧带的“韧带长入、爬行替代和骨腱愈合”过程;应用于足底筋膜炎“跟痛症”的治疗,与“局部封闭治疗”比较效果更明显;应用于肩关节炎(肩峰下、二头肌腱炎等)、创伤性或退变性的关节肿胀和滑膜炎的治疗,可以辅助消肿和止痛;PRP还可应用于肩、肘、腕、髋、膝、踝关节以及肌腱炎、腱鞘炎的治疗。

    在骨科领域的应用/富血小板血浆 编辑

    骨缺损修复

    骨缺损的修复一直是骨科临床所面临的难点之一,目前对骨缺损修复的方法主要有自体骨移植、同种异体骨移植、生物材料填充、组织工程技术、基因治疗等。自体骨移植时虽可以取得满意的疗效,但骨来源有限,且取骨不仅需要额外的手术操作,还增加患者痛苦,同时还会引起多种术后并发症及附加损伤。组织工程学的创立和发展为骨缺损的修复提供了新的思路和方法。复合成骨细胞和/或生长因子的生物材料具有良好的骨诱导性,在修复骨缺损中具有良好的应用前景。但是生长因子大多于体外制备,且多为单一因子,制备复杂,价格昂贵。Assoian首先发现了血浆中提取的PRP中含有多种生长因子,为骨缺损的修复提供了广泛的应用前景。Marx最早应用PRP进行骨缺损修复的临床研究,其研究结果表明,PRP复合移植骨修复速度比单用移植骨修复速度快1.162倍至2.116倍,PRP组移植骨密度(74.0%±11%)明显高于对照组(55.1%±8%)。Fujimori等将自体骨复合PRP用于兔胫骨缺损,研究发现PRP不仅加快新骨形成,同时提高新生骨质量。Kovacs等在犬下颌骨缺损修复研究中发现通过骨密度评价和组织学评价,复合PRP的生物材料组均优于单纯使用生物材料组,认为PRP对骨缺损有修复作用。

    脊柱融合方面的应用

    PRP的研究为脊柱融合开辟了一条新途径,它解决了自体骨来源有限,异体骨免疫排斥反应,生物材料无骨诱导活性,单一生长因子制作复杂、价格昂贵等缺陷,明显促进成骨作用,加速骨愈合能力,提高脊柱融合率,促进患者术后病情恢复及生活质量的提高。但目前PRP在脊柱融合方面尚处于研究阶段,相关报道有限。Lowery等证实PRP能够早期促进骨融合,在临床上应用于腰椎融合时产生良好的效果。Hee等报道,自体髂骨复合生长因子早期骨融合率高于单纯自体髂骨植骨,23例应用自体髂骨复合PRP患者中,术后4个月及6个月X线评价融合率为70%及96%,而自体髂骨移植患者中分别为36%及94%,术后24个月,两组间无明显差异,分别为96%和94%。Castro等在腰椎间孔入路腰椎椎间植骨融合术研究中发现,复合PRP组融合率低于对照组19%,分析原因可能与腰椎生物力学环境、制备PRP的技术、PLT数量、功能以及生长因子浓度有关。

    半月板关节软骨损伤与修复

    通常,受损的关节软骨本身只有很弱的再生修复能力,如何对受损的关节软骨进行修复、恢复关节面完整性、重建关节功能和防止关节退变是再生医学的研究热点。动物实验及临床应用均表明PRP具有促进损伤软骨组织修复的功能。Cugat等在兔全层软骨损伤模型中,首次应用局部注射自体PRP,发现软骨的生物力学行为明显改善,软骨细胞增殖,软骨损伤明显修复。Kon等最近报道关节内注射PRP治疗100例患有慢性膝关节软骨退行性疾病患者(每次注射PRP5ml,21天注射3次为一疗程),注射后注射口无菌包扎并嘱患者屈伸膝关节数次,术前和术后应用患者自评总体健康状况视觉类比量表(EQ-VAS)和国际膝关节评分委员会(IKDC)主观和客观评估表进行临床评分,结果显示治疗2个月、6个月和12个月后临床各项评分均较术前显着提高。Everts等在单侧全膝关节置换手术后应用PRP,随访5个月,发现应用PRP后关节纤维化程度较对照组明显减轻,关节活动范围明显好。Mitsuyama等研究了PRP对人类软骨细胞的作用,10位参与试验的志愿者分别提供全血和膝关节软骨组织,用于制作PRP和提取软骨细胞,将提取出的软骨细胞分别以不同浓度的PRP处理,观测其增殖情况。10天后观测结果显示,30%的PRP能显着促进人软骨细胞的增殖,细胞增殖不仅受PRP影响,而且与PRP浓度的增加成正相关。如上所述,PRP可以作为修复软骨时的一种治疗选择

    修复韧带/肌腱损伤

    肌腱组织由腱细胞、纤维胶原蛋白和水分构成,自身缺乏血液供应,故受损后的愈合速度慢于其他结缔组织。随着研究深入,学者们发现生长因子在韧带修复过程中起到至关重要的作用,进而尝试利用PRP来促进或辅助治疗肌腱损伤。Anitua等将PRP与人肌腱细胞共培养后发现,随着肌腱细胞的增殖,培养基中VEGF及肝细胞生长因子(HGF)也相应增加,而VEGF具有促进血管形成的作用,HGF具有抗纤维化作用,减少瘢痕形成。临床应用PRP治疗韧带/肌腱损伤取得满意疗效。Sánchez等收治12例跟腱撕裂患者,其中6例作为试验组在手术同时进行PRP辅助治疗,6例作为对照组只进行手术治疗。结果显示试验组患者恢复活动范围较对照组早,且未发生相关并发症,Mishra等应用超声引导使用PRP治疗慢性肘部肌腱疾病取得满意疗效。140例患者均首先给予理疗及其他非手术治疗,20例患者疼痛无好转,其中15例经皮下注射PRP,对照组5例注射布比卡因,随访皮下注射PRP患者中,8周后60%患者疼痛缓解,6个月后81%患者疼痛缓解,25.6个月后93%疼痛缓解并且能在更短时间内恢复训练活动

    预防骨与关节感染

    骨与关节感染是骨科手术面临的难题之一,常用预防方法是在围手术期应用抗生素。但长期大量应用抗生素不仅带来各种系统副作用,还会导致耐药菌株的出现。因此,有必要探索一种新的解决骨感染问题的方法。PRP由于其含有的高浓度血小板可以释放大量生长因子,当PRP被凝血酶激活后形成血小板-白细胞凝胶(PLG),其中含有高浓度的血小板和白细胞,这些细胞成分在机体先天免疫防御反应中发挥着趋化、吞噬和氧化杀菌等重要作用。此外,血小板还可释放大量生长因子促进被炎症破坏的组织细胞再生,为炎症消退提供良好的局部微环境。PRP的这种多重特性使其具有传统抗生素所不具备的优势。因此,作为一种“生物抗菌制剂”,PRP为我们预防和治疗骨感染提供了一种新的思路。Bielecki等通过纸片扩散法研究发现,PLG在体外可以抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长。Moojen等也报道了PLG在体外具有抑制金黄色葡萄球菌生长的作用。此外,一些临床研究表明PLG可降低外科手术后的出血和感染发生率。PLG在体外不仅可以抑制金黄色葡萄球菌的生长,而且在体内局部应用还可以抑制细菌生长,还可以协同机体免疫防御系统杀灭细菌,从而预防骨与关节感染的发生。

    面临问题

    PRP用于临床尤其是在骨科领域仍有许多尚未解决的问题,如PRP制备无统一标准,不同方法制备的PRP生长因子浓度差异大,PRP所含生长因子数量及其生长因子的相互作用机制仍不明确等。因此对PRP研究首先要建立一套高效稳定、对PLT破坏小、纯度高而稳定的PRP制备方法;其次在应用PRP时尽量避免影响PRP疗效的因素;选择适当的载体使PRP与载体结合以提高PRP骨再生能力,建立动物模型,设计标准化的试验,为PRP的临床应用提供依据。

    展望

    采用生物的方法解决生物和医学问题是目前研究组织修复的热点。PRP完全是自体的,无疾病传染及免疫排斥反应,从根本上解决了传播疾病的危险及骨组织工程学一直面临的移植物难以存活的难题;PRP中含有多种高浓度的生长因子,各生长因子的比例与体内正常比例相似,并具有最佳的协同作用,既有单一因子的生物学效应,又有各种生长因子之间的相互作用。这在一定程度上弥补了单一生长因子刺激成骨效果不佳的缺点,满足了早期骨愈合所需生长因子的需要;PRP有促凝血的作用,可刺激软组织再生,促进伤口早期愈合;PRP中所含的生长因子不进入细胞内或细胞核内,使正常的愈合过程加速,无致畸作用,也不具有诱导肿瘤形成的能力;PRP制作简单且对患者的损伤小,只需从患者的静脉取血即可制作PRP,国外已有专门制作PRP的仪器,操作简便并且所需时间短。因此,PRP是一种安全的、简便的、廉价的可用于骨科的各个治疗领域,应用前景广泛。

    在口腔颌面外科的应用/富血小板血浆 编辑

    颌骨由于其解剖及功能上的特殊性,其缺损的修复一直是口腔颌面外科临床所面临的难题之一。传统的颌骨重建方法主要有自体骨移植、异体或异种骨移植、人工合成生物材料等,存在着骨源有限、传播疾病、相容性及无诱导活性等缺陷。近期甚为活跃的组织工程化人工骨虽然有非常良好的应用前景,但是由于存在种子细胞需分离纯化、体外扩增及诱导成骨细胞方向分化等程序需时较长,而支架材料的物理、化学性能、组织相容性及降解率等与种子细胞的复合尚缺乏有效的调控,生长因子的适宜比例难以确定,故临床应用还有很长的路要走。因此,骨缺损的再生与重建是当前的热门研究课题之一。

    应用PRP行颌骨缺损的重建是近期提出的一个研究方向,并且已有在颌面部根治性外科切除术后、颌骨重建、牙槽嵴裂的修复、牙种植外科及其它相关的骨科领域成功应用的报道。

    在颌面部根治性外科切除术后遗留一些重要的硬组织及软组织缺损。对这些缺损的修复主要是功能性修复。优先的重建方法为:1)在手术切除时骨的稳定及软组织的重建;2)延迟进行骨的定形重建,让软组织创口愈合。在手术过程中常规应用PRP,当软组织分层缝合时,在组织下应用一厚层的血小板凝胶,利用其凝胶的性质止血及粘结组织瓣关闭创口,通过凝胶内血小板的激活及前述的生长因子产物的释放促进创口愈合。

    自体血小板凝胶复合颗粒松质骨及骨髓(PCBM)压缩在异体或异种支架内,使移植物可获得足够的、充实的填充置入。除了可粘结软组织瓣以外,凝胶内的血小板还可释放大量的生长因子促进创口的愈合。应用此项技术的所有病例均能满足Marx的下颌骨重建的成功标准。然而因受区软组织切除后常造成与口腔交通,导致移植物继发感染而失败达35%。在这种情况下将穿通处采用荷包缝合,应用一层PRP凝胶,可避免感染或移植失败。应用颗粒松质骨及骨髓复合自体纤维素凝胶(autologousfibrinadhesive,AFA)重建肿瘤根除术后遗留的下颌骨节段性缺损。术后随访,全景片结果显示骨重建在4周时显着。用PRP干预体外培养的骨髓基质细胞,发现PRP加速骨髓基质细胞的生长,基质细胞定向分化为成骨细胞后的成骨活性较单纯培养细胞高,分泌ALP及形成钙盐的能力强,细胞增殖及分裂数目显着高于对照常规培养组。应用复合PRP移植骨修复下颌骨缺损,结果复合PRP移植骨是单纯移植骨修复速度1.62~2.16倍,骨密度为(74.0±11)%高于对照组骨密度(55.1±8%),(P<0.005)。

    应用PRP复合多孔矿化牛骨诱导组织再生(PRP/BPBM/GTR)与GTR治疗人牙周骨缺损,术后3周伤口完全愈合,PRP/BPBM/GTR组袋深度为2.83~2.89mm,GTR组牙周袋深度为4.13~4.16mm。临床上皮附着水平PRP/BPBM/GTR组比GTR组增加为1.75~1.84mm;龈退缩水平两组间无明显差别;PRP/BPBM/GTR骨缺损充满平均为4.66~4.78mm,GTR组为2.26~2.31mm,两者间差别有统计学意义。

    口腔种植技术常面临的难题之一是局部骨量不足的问题。严重的牙槽嵴萎缩常不能行种植体植入。垂直向的下颌骨萎缩可通过牵引成骨解决,牵引成骨期间成骨前体细胞向成骨细胞的增殖及分化,此过程依赖于局部血管化及足够的血供。PRP中的PDGF可促进骨生成,术后60d时X线检查新生骨有早期矿化的迹象;牵引器去除后可见未重建的编织骨,但可以维持种植体的稳定。上颌后牙区牙槽骨高度不足时,行种植体植入时常易造成上颌窦底黏膜穿通致种植体周围感染而失败。此时应用自体髂骨复合PRP窦底提升技术,同期行种植体植入与未复合PRP的窦底升高术相比愈合时间缩短了1/3。用Bio-Oss复合自体PRP上颌窦提升同期植入骨内牙种植体,4周时骨密度达到或超过邻近正常骨密度,可以负载修复体,比没有复合PRP的Bio-Oss时间缩短3~4倍。

    秃顶治疗/富血小板血浆 编辑

    2013年5月,来自国际毛发研究基金会、意大利布雷沙大学和以色列希伯来大学研究中心的科学家们共同完成了这项测试,测试者是45位男性脱发者,一部分人注射富血小板血浆;一部分人涂抹类固醇乳霜;剩余的人则使用安慰剂。这些不同的治疗方法以每个月作为治疗周期,研究人员测试秃顶处新生头发的数量,结果显示富血小板血浆注射之后生长头发的效果远超过其它两种方法。这项研究的详细资料发表在《英国皮肤医学杂志》上,科学家希望能够研制一种乳霜,从而不必使用注射的方式。

    添加视频 | 添加图册相关影像

    开放分类 我来补充
    细菌药学名词血浆

    互动百科的词条(含所附图片)系由网友上传,如果涉嫌侵权,请与客服联系,我们将按照法律之相关规定及时进行处理。未经许可,禁止商业网站等复制、抓取本站内容;合理使用者,请注明来源于www.baike.com。

    登录后使用互动百科的服务,将会得到个性化的提示和帮助,还有机会和专业认证智愿者沟通。

    互动百科用户登录注册
    此词条还可添加  信息模块

    WIKI热度

    1. 编辑次数:13次 历史版本
    2. 参与编辑人数:8
    3. 最近更新时间:2017-04-11 14:47:59

    相关词条

    互动百科

    扫码下载APP