该片主要讲述了蜘蛛侠成为了受人敬仰的美国英雄后，但被“毒液”共生体寄生的彼得却开始变得目中无人，后来彼得摆脱毒液，并与好友联手对抗毒液和沙人的故事。[2] 该片于2007年4月16日在日本东京六本木新城森大厦首播。5月3日，在中国大陆及港台首播。5月4日，在美国首播。 剧情简介
经过先前的几番周折和思想斗争，彼得·帕克终于在章鱼博士手中救出自己的挚爱玛丽·简·沃岑之后，平衡了在心中冲突许久的“爱情”与“作为蜘蛛侠责任感”之间的矛盾。此后，渐渐进入平静的纽约城以及众多喜爱蜘蛛侠的人们也更加开始喜欢这位“蜘蛛英雄”了。而沉浸在幸福中的彼得则每日充分享受着《号角日报》的记者工作，另外，彼得更是时刻会以“蜘蛛侠”的身份及时出现于那些敢于冒犯法律的街头罪犯们的面前。