免疫组化

抗原与抗体特异性结合的原理
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免疫组化（IHC）是利用抗体检测组织切片中蛋白质和其他抗原的定位。抗体-抗原的相互作用通过有色酶底物显色检测或荧光染料荧光检测进行观察。[1]免疫组化方法有直接法和间接法；按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等。[2]
免疫组化广泛应用于医学研究、生物学检测和病理诊断等许多领域，包括：了解生物标志物和差异表达蛋白在生物组织不同部位的分布和定位；恶性肿瘤的鉴别与诊断，对某些肿瘤进行进一步的病理分型；转移瘤的原发部位或者起源的判定；发现微小病灶，指导临床治疗方案及手术范围选择；指导靶向药物开发及适用疾病选择，临床治疗中靶向药物使用。[3]
免疫组化实验注意事项：切片脱蜡和水化要充分，加反应液时要覆盖组织充分;每次加液前甩干洗涤液，同时防止干片。一抗的冲洗原则：单独冲洗，防交叉反应污染;温柔冲洗，防止切片脱落;推荐浸洗方式。有条件的话最好立即拍照，若不能及时拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和湿度。[4]

基本原理

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。