免疫组化检查

抗体抗原具有高度特异性结合原理

条目

免疫组化检查（immunohistochemistry examination）指应用免疫学抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色，确定组织或细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对的定量检查。

原理

免疫组织化学利用抗体和抗原具有高度特异性结合的原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性抗体，再以此抗体探测组织或细胞中的同类抗原。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此必须借助组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显现，以达到对未知抗原进行定性、定位或定量。

分类

1.按标记物质的种类分类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。
2.按染色步骤分类，可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。
3.按结合方式分类，可分为：①抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；②亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等。其中SP法是比较常用的方法；③聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。