非放射性Dig-dUTP

非放射性Dig-dUTP
DNA是通过异基洋地黄毒[gān](digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿[][dìng]核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记。dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基,形成Dig-dUTP,杂交反应后,杂交的靶DNA通过酶联免疫法与一个抗体复合物抗异羟基洋地黄毒苷配基碱性磷酸酶复合物(Dig)Ap结合,接着在5-溴-4氯-3-吲哚磷酸盐(X-磷酸盐)和硝基四氮唑蓝(NBT)存在下,由酶催化反应,在杂交部位形成蓝紫色带或颗粒。

形成

dUTP通过间臂连结类固醇半抗原异羟基洋地黄毒苷酸基

特点

1.转移通过打点吸渍、噬菌斑或Sonthern印迹转移等方法,把被测的DNA转移到硝酸纤维膜或尼龙膜上。