电压钳(voltage clamp)又叫电压钳制或电压固定,是一种电生理学实验方法,由Cole和Marmont设计,后经Hodgkin和Huxley改进并成功地应用于神经纤维动作电位的研究。该技术通过插入神经细胞内的微电极向细胞内补充电流,使得补充的电流量正好等于跨膜流出的反向离子流,即使细胞膜通透性发生改变,也能控制膜电位的数值不变。电压钳能够记录输送的电流,从而研究膜通道的电流-电压关系。 设计原理
其设计原理是根据离子作跨膜移动时形成了跨膜离子电流(I),而通透性即离子通过膜的难易程度,其膜电阻(R)的倒数,也就是膜电导(G)。因此,膜对某种离子通透性增大时,实际上时膜电阻变小,即膜对该离子的电导加大。根据欧姆定律V=IR,即I=V/R=VG,所以,只要固定膜两侧电位差(V)时,测出的跨膜电流(I)的变化,就可作为膜电导变化的度量,即可了解膜通透性的改变情况。电压钳通过迭代地测量膜电位,然后通过添加必要的电流将膜电位(电压)更改为所需值,从而使细胞膜“钳”在所需的恒定电压上。 内部设置
电压钳装置(附件1)有两个微电极插入细胞,一个是测量膜电位的微 电极Em,它通过高阻抗前级放大器(XI)检测膜电位(Em),并将信号输入反馈放大器(FBA);另一电极I’与FBA输出端相连,用作向细胞内注入电流,FBA的两个输入端中一个接受电位Em的输入,另一个接受指 令电位(C),当两者电位相等时输出电流为零,当两者出现差异时,FBA经电极I’输出向细胞内注入电流,该电流在膜两侧产生趋向于指令电位C的电位变化,如此构成一个使膜电位始终等于指令电位C的反馈电路,此时记录的Im就可反映膜电导G的变化。其实Im就是经电极I’注入的电流,后者在电压钳制期间精确地对抗通道电流而使膜电流保持恒定。